厭氧培養(yǎng)袋培養(yǎng)的實驗步驟

　　厭氧培養(yǎng)袋可在小或中空間制作厭氧環(huán)境，操作方便，無需任何復雜的專用設備，可在所有實驗室使用，非常適合實驗室中小型試驗操作。

 

　　厭氧培養(yǎng)袋可用于培養(yǎng)厭氧菌，專用厭氧菌需要在嚴格的無氧氣體環(huán)境中生長，氧氣會對細菌產(chǎn)生毒性作用。一些厭氧菌在含有5％－10％二氧化碳的氣體環(huán)境中可以耐受低濃度氧氣。

 

　　常見的專用厭氧菌有梭菌，如產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、破傷風梭菌、困難梭菌等，雙歧桿菌，如嬰兒雙歧桿菌、動物雙歧桿菌等，擬桿菌、梭菌、厭氧消化鏈球菌等。

 

　　培養(yǎng)基要與厭氧環(huán)境氣體循環(huán)，如試管、錐形瓶等容器，以確保塞的透氣性；培養(yǎng)平板容器時，要確保平板容器具有良好的透氣性，不能用密封膜密封纏繞。

 

　　實驗步驟：

 

　　1、將已接種細菌的血平板以及產(chǎn)氣管，指示劑，催化劑放入塑料袋內(nèi)，排出袋中氣體，卷疊好袋口，并用大鐵夾將塑料袋夾緊密，以防漏氣。

 

　　2、折斷產(chǎn)氣管，管內(nèi)發(fā)生反應，產(chǎn)生CO2和H2.CO2供細菌生長需要，能促使許多厭氧菌生長，鈀催化劑可催化H2和袋內(nèi)的O2生成H2O，從而耗盡袋內(nèi)的O2，待其化學作用完成后，袋內(nèi)即處于無氧狀態(tài)。（由此造成厭氧環(huán)境約需半小時）

 

　　3、于產(chǎn)氣管弄破半小時后，將裝有已還原成無色的美藍指示劑安瓿弄破，若溶液變藍色，表示美藍被氧化，袋內(nèi)仍有氧氣存在，如指示劑不變藍色，即表示袋內(nèi)已處于無氧狀態(tài)。

 

　　4、將厭氧袋置37℃溫箱孵育，48小時后觀察結果。